Семенко Олена Валентинівна. Удосконалення методів зажиттєвої діагностики бабезіозу собак : дис... канд. вет. наук: 16.00.11 / Національний аграрний ун-т. — К., 2007. — 152арк. — Бібліогр.: арк. 110-139.
Анотація до роботи:
Семенко О.В. Удосконалення методів зажиттєвої діагностики бабезіозу собак. – Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук за спеціальністю 16.00.11 – паразитологія, гельмінтологія. – Національний аграрний університет, Київ, 2007.
Дисертацію присвячено розробці та отриманню антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак, вивченню динаміки титру антитіл при експериментальному зараженні тварин збудником бабезіозу та при застосуванні протибабезіозної гіперімунної сироватки крові з профілактичною та лікувальною метою. Досліджено морфологічні зміни крові при бабезіозі собак з метою їх можливого використання в діагностиці та при прогнозуванні даного протозоозу.
За результатами виконаних досліджень вперше в Україні був отриманий, досліджений і запропонований антиген для серологічної діагностики бабезіозу собак.
Вперше проведена порівняльна характеристика за показниками активності, специфічності та актикомплементарними властивостями виготовленого нами антигену з антигенами, виготовленими за іншими методиками.
За допомогою отриманого антигену вивчено динаміку антитілоутворення при експериментальному бабезіозі та при застосуванні собакам виготовленої гіперімунної протибабезіозної сироватки. Доведено, що застосування гіперімунної протибабезіозної сироватки крові викликає циркуляцію комплементзв’язуючих антитіл в крові протягом трьох тижнів, що підтверджує її лікувально-профілактичні властивості.
1. У дисертаційній роботі наведено теоретичне узагальнення і нове вирішення наукових завдань, які стосуються удосконалення зажиттєвої діагностики бабезіозу собак. Виявлено основні чинники, які впливають на рівень паразитемії. Запропоновано спосіб виготовлення антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак. Проведена порівняльна характеристика антигенів, виготовлених за різними методиками. Доведено, що активність антигену істотно залежить від ступеня паразитемії взятої сировини та режиму її обробки. Вивчено динаміку антитілоутворення при експериментальному зараженні собак Babesia canis та при застосуванні гіперімунної протибабезіозної сироватки крові. Вивчено характер морфофункціональних змін крові при бабезіозі собак.
2. Проведення спленектомії суттєво не впливає на рівень паразитемії Babesia canis у собак. З метою одержання крові (як сировини для виготовлення антигену) з максимальною кількістю збудників бабезіозу краще використовувати цуценят 4-5 міс. віку.
3. Застосування при виготовленні антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак в якості антикоагулянта та консерванта крові розчину глюгіциру з розрахунку 1:4 дозволяє подовжити час її обробки на 1-2 доби. Запропоновані режими центрифугування крові дозволяють при мінімальних режимах отримати максимальне очищення матеріалу. Використання сапоніну (1:10000) для лізису еритроцитів значно скорочує термін обробки матеріалу та запобігає втратам сировини. Застосування в якості консерванта азиду натрію в розведенні 1:10000 не впливає на активність антигену.
4. Отриманий за запропонованою нами методикою антиген є специфічним, не гемотоксичним, немає антикомплементарних властивостей і може використовуватись для серологічної діагностики бабезіозу собак. За показниками активності, специфічності, гемотоксичності та антикомплементарними властивостями він не поступається антигену, виготовленому за методикою Расстригіна О.Є., Георгіу Х. (2005) і за показниками активності перевищує антиген, виготовлений за методикою Балагули Т.В., Акаєва М.Ш. (2000).
5. В сироватці крові собак, експериментально заражених Babesia canis, комплементзв’язуючі антитіла з’являються в низьких титрах (1:6±0,25) на 10-ту добу і досягають максимальних показників (1:47±3,4,) на 100-ту добу (Р<0,01), після чого поступово знижуються. При повторному зараженні собак збудником бабезіозу вже через тиждень спостерігається різке підвищення титрів антитіл в сироватці крові (до 1:151±3,6).
6. Введення гіперімунної протибабезіозної сироватки крові забезпечує циркулювання комплементзв’язуючих антитіл в крові собак протягом трьох тижнів у титрах 1:62±0,002–1:46±0,005, що попереджає розвиток гострого перебігу бабезіозу. Підшкірне введення крові із збудником бабезіозу на фоні застосування гіперімунної протибабезіозної сироватки значно подовжує час їх циркуляції (8 місяців – час спостереження) та підвищує рівень титрів комплементзв’язуючих антитіл в крові. Це явище може бути використане для розробки вакцини проти бабезіозу.
7. В гострий період бабезіозу собак патологія клітин крові характеризується вираженим анізоцитозом, пойкілоцитозом з переважанням зірчастих, витягнутих, веретеноподібних, каплеподібних, сфероїдних форм, появою гіпохромних еритроцитів, поліхроматофілів, що опосередковано свідчить про розвиток гемолітичної анемії. Дослідження морфологічних змін крові має допоміжне значення при встановленні діагнозу на бабезіоз.
8. Встановлена пряма залежність між ступенем активного фагоцитозу уражених бабезіями еритроцитів моноцитами і лімфоцитами та рівнем паразитемії, що свідчить про сприятливий перебіг захворювання.
Публікації автора:
Статті, опубліковані у збірниках наукових праць і наукових журналах
Семенко О. В. Отримання сировини для виготовлення антигену з метою діагностики бабезіозу собак // Науковий вісник НАУ. – К. – 2005. – Вип.86. – С. 195-198.
Семенко О.В. Морфологічні зміни клітин крові за бабезіозу собак // Вестник зоологии – К. – 2005. – Вып.19. – Ч.2. – С. 289-290.
Семенко О.В. Динаміка антитілоутворення при експериментальному зараженні собак збудником Babesia canis // Науковий вісник Львівської національної академії ветеринарної медицини ім. С.З. Гжицького. – Львів. – 2006. – Т.8. – №2 (29). – Ч.1. – С. 162-166.
Семенко О.В. Динаміка титру антитіл у собак при застосуванні протибабезіозної гіперімунної сироватки крові // Збірник наукових праць. Ветеринарні науки (Проблеми зооінженерії та ветеринарної медицини). – Харків. – 2006. – №13 (38). – Ч.3. –С. 350-354.
Семенко О.В., Прус М.П., Галат В.Ф. Отримання антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак // Науковий вісник НАУ. – 2006. – №98. – С. 168-172. (Здобувачем запропонована методика отримання антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак, проведені дослідження щодо показників активності і специфічності антигену)
Семенко О.В., Прус М.П. Зміни клітин крові за бабезіозу у собак // Електронний журнал: Наукові доповіді НАУ. – 2006. – №4. – . (Здобувач описала зміни клітин крові, що спостерігаються при цьому протозоозі).
Методичні рекомендації
Рекомендації з діагностики бабезіозів свійських тварин та заходи боротьби з ними / Прус М.П., Березовський А.В., Галат В.Ф., Краснянчук І.В., Семенко О.В. – К.: Ветінформ, 2005. – 18 с. (Здобувач описала серологічну діагностику бабезіозу собак).
Патенти
Деклараційний патент України на корисну модель 14078 Україна, А61К 39/395. Спосіб профілактики бабезіозу собак / Прус М.П., Галат В.Ф. Семенко О.В.; заяв. 01.07.2004, опубл. 15.05.2006, бюл. №5 (Здобувачем проведено патентний пошук і взята участь у застосуванні гіперімунної протибабезіозної сироватки крові, з метою профілактики бабезіозу, обґрунтовано її ефективність).
Деклараційний патент України на корисну модель 14392 Україна, А61К 39/018. Спосіб отримання антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак / Семенко О.В., Прус М.П., Галат В.Ф.; заяв. 15.11.2005, опубл. 15.05.2006, бюл. №5 (Здобувачем проведено патентний пошук і запропоновано спосіб отримання антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак, обґрунтовано його ефективність).
Патент на винахід 75249 Україна, А61К 39/395. Спосіб виготовлення гіперімунної протибабезіозної сироватки крові собак / Прус М.П., Галат В.Ф. Семенко О.В.; заяв. 01.07.2004, опубл. 15.03.2006, бюл. №3 (Здобувачем проведено патентний пошук і взята участь у виготовленні гіперімунної протибабезіозної сироватки крові).
Тези доповідей на наукових конференціях
Епізоотична ситуація щодо бабезіозу собак у деяких містах України / Прус М.П., Галат В.Ф., Козачок В.С.. Дідаш К.В., Краснянчук І.В., Семенко О.В. / Тези доп. 2-ї конф. проф.-викл. складу і аспірантів ННІВМЯБПАПК – К., 2003. – С. 58. (Здобувач узагальнила результати досліджень).
Прус М.П., Семенко О.В. Експериментальні дослідження впливу гіперімунної протибабезіозної сироватки крові собак на імунокомпетентні клітини крові // Тези доп. конф. проф.-викл. складу і аспірантів ННІВМЯБПАПК. – К., 2004. – С. 82. (Здобувач брала участь у проведенні експериментальних досліджень та виступила з доповіддю).
Прус М.П., Семенко О.В. Експериментальні дослідження по вивченню впливу гіперімунної протибабезіозної сироватки крові собак на імунокомпетентні клітини крові та з’ясування можливості використання її для профілактики бабезіозу собак // Матеріали ІХ міжн. наук.-практ. конф. “Проблеми вет. обслуговування дрібн. дом. тварин” – К., 2004. – С. 21-26. (Здобувач брала участь у проведенні експериментальних досліджень).
Прус М.П., Семенко Е.В. Применение гипериммунной противобабезиозной сыворотки для профилактики бабезиоза собак // Матеріали V Міжнародної науково-практичної конференції з проблем дрібних тварин. – Одеса, 2006. – С. 24-27. (Здобувач узагальнила результати досліджень).
Семенко О.В. Динаміка титру антитіл при експериментальному бабезіозі собак // Тези доп. конф. проф.-викл. складу, наук. співроб. і аспірантів ННІВМЯБПТ – К., 2006. – С. 94.
